是什么卡了我们的脖子——

“靶点”难寻，国产创新药很迷惘

亟待攻克的核心技术⑧

iCLIP技术的发明，让人们抛弃精密的观测仪器，也能确定RNA(核糖核酸)和蛋白质在哪个位置“交汇”，甚至可以读出位点“密码”。

生物学者习惯将iCLIP这个词拆解为3部分，i：单点，就像捋着一条绳子，看它上面哪里打了个结，哪里挂了“灯笼”；CL：交联，通过紫外照射等方法让细胞内RNA和蛋白质的关系好成“老铁”，扯也扯不断；IP：沉淀，把“老铁们”从细胞里“薅”出来，有目的地处理。

iCLIP技术难，犹如万千人海中找一个人，要从几十亿个碱基对找到一个或几个确定的结合点，精确度可想而知。自2010年该技术在《细胞》上首发，近几年已逐渐成为相关领域论文登上CNS(《细胞》《自然》《科学》)顶级刊物的“标配”实验技术，国内实验室却极少有成熟经验。

有文章报道，国外研究团队已在RNA操控中展开“技术竞赛”，研究论文以几个月为周期轮番在CNS上演。越来越多证据显示，非编码RNA同样控制着生命活动，RNA上大量未被发现的作用位点，可能是创新药的潜在靶点，iCLIP是发现潜在靶点的“利器”之一。

条件摸索耗时耗力耗感情

“条件的摸索纯粹是体力活。”一位熟悉该技术的研究人员表示，虽然实验技术无需购买、不受专利限制、能够从期刊文献中学来，但从国外期刊中检索到的技术路线完全无法照搬，不同种类细胞(淋巴细胞、巨噬细胞等)需要一整套完全不同的技术体系。

以IP那部分“免疫共沉淀”为例，要想“薅”对“老铁”，必须要选择正确的抗体，进行正确的抗原抗体反应。进行细胞培养、裂解等多步实验之后，研究人员才能知道抗体对不对，科研团队通常会从多家公司购买抗体，同时从公司定制，多条腿走路，否则浪费时间和情感。

普遍认为，实验室如果没有对某一个蛋白的抗原抗体反应的经验积累，不熟悉几个靠谱的抗体生产公司，那是不敢贸然尝试“薅”这一步的。“很费时间，抗体是特异性的，3—6个月才能生产出来，也很费钱，一小管抗体好几千元。”该研究人员说。

裂解液浓度、RNA酶的确定完全是基础化学实验的方法，“扫荡式”的排查之后才能够确定合适的浓度和种类。加“陡”了，很可能什么都得不到，加少了，又会留下很多杂质，摸索就是在“不漏网一个”和“不错杀一千”中寻求平衡点。

“RNA比DNA脆弱。”清华大学生命科学院教授杨茂君说，因此对反应条件的控制相当苛刻，容错度较低。

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